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编 号：F296775
分子式：C25H26N2O4
分子量：418.49
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CAS No: 260430-02-2
产品详情
生物活性：
Cyanines are formally compounds with two nitrogen atoms linked by an odd number of methene units. 26 28 The nitrogen atoms are parts of the heterocyclic units (such as indole, benzoxazol, or benzothiazol) . The structures and optical properties of representative cyanine dyes used for in vivo imaging are presented. Cyanines are characterized by long wavelength, tunable absorption and emission, very high extinction coefficient (up to 300,000 M 1 cm 1), good water solubility, and relatively straightforward synthesis.
体外研究：
原液制备1. 蛋白准备为了获得最佳标记效果，请将蛋白 (抗体) 浓度配制为 2 mg/mL。1) 蛋白溶液 pH 值应为 8.5±0.5，若 pH 低于 8.0，则用 1 M 碳酸氢钠进行调整。2) 若蛋白浓度低于 2 mg/mL，标记效率会大大降低，为了获得最佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为 2-10 mg/mL。3) 蛋白必须在不含伯胺 (如 Tris 或甘氨酸) 和铵离子的缓冲液中，否则会影响标记效率。2. 染料准备将无水 DMSO 稀释 CY 染料，制成 10 mM 储备溶液。通过玻璃管或旋涡充分混合。注：CY 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。3. 染料工作液用量计算标记反应所需的 CY 染料用量取决于要标记蛋白的用量，CY 染料与蛋白的最佳摩尔比为 10 左右。例：假如所需标记蛋白为 500 μL 2 mg/mL 的 IgG (MW=150,000),用 100 μL DMSO 溶解一管 1 mg CY 染料，则所需 CY 体积为 3.95 μL，详细计算流程如下 (以 CY3-NHS ester 为例) ：1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG) ×mL (IgG) / MW (IgG) =2 mg/mL×0.5 mL / 150,000 mg/mmol= 6.7×10-6 mmol2) mmol (CY3-NHS ester) = mmol (IgG) ×10 =6.7×10-6 mmol×10 = 6.7×10-5 mmol3) μL (CY3-NHS ester) = mmol (CY3-NHS ester) ×MW (CY3-NHS ester) / mg/μL (CY3-NHS ester) = 6.7×10-5 mmol× 590.15 mg/mmol / 0.01 mg/μL =3.95 μL (CY3-NHS ester) 使用方法1. 标记反应1) 取算好体积的新鲜配制的 10 mg/mL CY 染料缓慢加入到 0.5 mL 蛋白样品溶液中，轻轻摇匀混合，然后短暂离心将样品收集在反应管底部。切忌剧烈混匀，防止蛋白样品变性失活。2) 将该反应小管置于避光处，在室温条件下轻轻摇晃孵育 60 分钟，每隔 10–15 分钟，将反应小管轻轻颠倒几次，以充分混合两种反应物，提高标记效率。2. 蛋白纯化脱盐以下方案是使用 SepHadex G-25 柱纯化染料蛋白偶联物为例。1) 按照生产说明书制备 SepHadex G-25 柱。2) 将反应混合物装入 SepHadex G-25 色谱柱顶部。3) 当样品运行到顶部树脂表面下方时，立即加入 PBS (pH 7.2-7.4)。4) 向所需样品中加入更多的 PBS (pH 7.2-7.4),完成柱纯化。结合含有所需要的染料-蛋白质缀合物的组分。注意事项：1.CY染料对光及湿度敏感。即用即配CY溶液并丢弃未使用的部分。2.低浓度的叠氮化钠(≤3 mM或0.02％)或硫柳汞(≤0.02 mM或0.01％)不会显著干扰蛋白标记；但是20-50％ 的甘油会降低标记效率。3.避免使用含伯胺(例如Tris，甘氨酸)或铵离子的缓冲液，它们与待标记蛋白会发生竞争反应降低标记效率。4.未活化的染料，需先使用缩合液（500 ug/mL）（25952-53-8）活化后方可进行后续标记实验。5.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
Cyanines are formally compounds with two nitrogen atoms linked by an odd number of methene units. 26 28 The nitrogen atoms are parts of the heterocyclic units (such as indole, benzoxazol, or benzothiazol) . The structures and optical properties of representative cyanine dyes used for in vivo imaging are presented. Cyanines are characterized by long wavelength, tunable absorption and emission, very high extinction coefficient (up to 300,000 M 1 cm 1), good water solubility, and relatively straightforward synthesis.
体外研究：
原液制备1. 蛋白准备为了获得最佳标记效果，请将蛋白 (抗体) 浓度配制为 2 mg/mL。1) 蛋白溶液 pH 值应为 8.5±0.5，若 pH 低于 8.0，则用 1 M 碳酸氢钠进行调整。2) 若蛋白浓度低于 2 mg/mL，标记效率会大大降低，为了获得最佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为 2-10 mg/mL。3) 蛋白必须在不含伯胺 (如 Tris 或甘氨酸) 和铵离子的缓冲液中，否则会影响标记效率。2. 染料准备将无水 DMSO 稀释 CY 染料，制成 10 mM 储备溶液。通过玻璃管或旋涡充分混合。注：CY 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。3. 染料工作液用量计算标记反应所需的 CY 染料用量取决于要标记蛋白的用量，CY 染料与蛋白的最佳摩尔比为 10 左右。例：假如所需标记蛋白为 500 μL 2 mg/mL 的 IgG (MW=150,000),用 100 μL DMSO 溶解一管 1 mg CY 染料，则所需 CY 体积为 3.95 μL，详细计算流程如下 (以 CY3-NHS ester 为例) ：1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG) ×mL (IgG) / MW (IgG) =2 mg/mL×0.5 mL / 150,000 mg/mmol= 6.7×10-6 mmol2) mmol (CY3-NHS ester) = mmol (IgG) ×10 =6.7×10-6 mmol×10 = 6.7×10-5 mmol3) μL (CY3-NHS ester) = mmol (CY3-NHS ester) ×MW (CY3-NHS ester) / mg/μL (CY3-NHS ester) = 6.7×10-5 mmol× 590.15 mg/mmol / 0.01 mg/μL =3.95 μL (CY3-NHS ester) 使用方法1. 标记反应1) 取算好体积的新鲜配制的 10 mg/mL CY 染料缓慢加入到 0.5 mL 蛋白样品溶液中，轻轻摇匀混合，然后短暂离心将样品收集在反应管底部。切忌剧烈混匀，防止蛋白样品变性失活。2) 将该反应小管置于避光处，在室温条件下轻轻摇晃孵育 60 分钟，每隔 10–15 分钟，将反应小管轻轻颠倒几次，以充分混合两种反应物，提高标记效率。2. 蛋白纯化脱盐以下方案是使用 SepHadex G-25 柱纯化染料蛋白偶联物为例。1) 按照生产说明书制备 SepHadex G-25 柱。2) 将反应混合物装入 SepHadex G-25 色谱柱顶部。3) 当样品运行到顶部树脂表面下方时，立即加入 PBS (pH 7.2-7.4)。4) 向所需样品中加入更多的 PBS (pH 7.2-7.4),完成柱纯化。结合含有所需要的染料-蛋白质缀合物的组分。注意事项：1.CY染料对光及湿度敏感。即用即配CY溶液并丢弃未使用的部分。2.低浓度的叠氮化钠(≤3 mM或0.02％)或硫柳汞(≤0.02 mM或0.01％)不会显著干扰蛋白标记；但是20-50％ 的甘油会降低标记效率。3.避免使用含伯胺(例如Tris，甘氨酸)或铵离子的缓冲液，它们与待标记蛋白会发生竞争反应降低标记效率。4.未活化的染料，需先使用缩合液（500 ug/mL）（25952-53-8）活化后方可进行后续标记实验。5.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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